Reacția în lanț a polimerazei (PCR) este o metodă de înaltă precizie în domeniul diagnosticării patologiilor ereditare, infecțiilor, bolilor virale în orice stadiu (acut sau cronic), precum și - într-un stadiu incipient - înainte de manifestările evidente ale bolii prin identificarea agenți patogeni pe baza lor ADN, ARN, care sunt material genetic, în probele obținute de la pacient. Și astăzi vom vorbi despre esența, etapele de diagnosticare și principiile metodelor de reacție în lanț a polimerazei (PCR), precum și despre costul acesteia.

Ce este reacția în lanț a polimerazei

Baza analizei este amplificarea (dublarea) - crearea multor copii dintr-o secțiune scurtă de ADN (acid dezoxiribonucleic), care reprezintă complexul genetic uman. Studiul necesită o cantitate foarte mică de substanță fiziologică (sputa, fecale, răzuire epitelială, suc de prostată, sânge, spermatozoizi, lichid amniotic, mucus, țesut placentar, urină, salivă, lichid pleural, lichid cefalorahidian).

În acest caz, de exemplu, chiar și un singur microbi dăunător poate fi detectat în tractul genito-urinar al pacientului.

Tehnica PCR (reacție în lanț a polimerazei) a fost dezvoltată de omul de știință american K. Mullis, care a primit Premiul Nobel în 1993.

• Folosit activ:
• în diagnosticul precoce al infecțiilor, genetice;
• la examenul medico-legal atunci când există o cantitate extrem de mică de ADN disponibilă pentru examinare;
• în medicină veterinară, farmaceutică, biologie, genetică moleculară;
• pentru identificarea unei persoane prin ADN, confirmarea paternității;

în paleontologie, antropologie, ecologie (la monitorizarea calității produselor, factorilor de mediu).

Acest videoclip vă va spune în detaliu ce este o reacție în lanț a polimerazei:

Cui i se prescrie?

Reacția în lanț a polimerazei în diagnosticul bolilor infecțioase este una dintre cele mai fiabile metode de precizie și fiabilitate deosebite. De exemplu, fiabilitatea analizei PCR pentru chlamydia și mulți alți agenți patogeni este aproape de 100% (absolut). Cel mai adesea, procedura de reacție în lanț a polimerazei este prescrisă pacienților care au dificultăți în identificarea unui anumit agent patogen în timpul diagnosticului.

• pentru a detecta agenți patogeni care provoacă infecții ale organelor urinare și genitale greu de identificat prin culturi sau metode imunologice;
• pentru rediagnosticarea HIV stadiu inițialîn cazul unui rezultat pozitiv, dar îndoielnic al analizei inițiale (de exemplu, la nou-născuți din părinți infectați cu SIDA);
• pentru a identifica cancerul într-un stadiu incipient (studiul mutațiilor oncogene) și corectarea individuală a regimului de tratament pentru un anumit pacient;
• în scopul depistarii precoce și al potențialului tratament al patologiilor ereditare.

Astfel, viitorii părinți fac un test pentru a afla dacă sunt purtători ai unei patologii genetice la copii, PCR determină probabilitatea de expunere la o boală transmisă prin moștenire;

• pentru a detecta patologiile fetale devreme gestație (celulele individuale ale embrionului în creștere sunt examinate pentru posibile mutații);
• la pacienții înainte de transplantul de organe - pentru „tiparea țesuturilor” (determinarea compatibilității tisulare);
• pentru a identifica organismele patogene periculoase din sângele donat;
• la nou-născuți - pentru a identifica infecțiile ascunse;
• pentru a evalua rezultatele tratamentului antiviral și antimicrobian.

De ce să fii supus unei astfel de proceduri?

Deoarece PCR este o metodă de diagnosticare extrem de eficientă, dând rezultate de aproape 100%, procedura este utilizată:

• pentru a confirma sau exclude diagnosticul final;
• evaluarea rapidă a eficacității terapiei.

În multe cazuri, PCR este singurul test posibil pentru detectare dezvoltarea bolii, dacă alte metode de diagnostic bacteriologic, imunologic și virusologic sunt inutile.

• Virușii sunt detectați folosind o procedură PCR imediat după infecție și înainte de apariția semnelor de boală. Detectarea precoce a virusului permite un tratament prompt.
• Așa-numita „încărcare virală” (sau numărul de viruși din organism) este de asemenea determinată prin analiza ADN-ului folosind o metodă cantitativă.
• Agenții patogeni specifici (de exemplu, bacilul tuberculozei Koch) sunt dificili și durează prea mult până la cultură. Analiza PCR permite detectarea rapidă a cantităților minime de agenți patogeni (vii și morți) în probe convenabile pentru testare.

Se utilizează analiza detaliată a ADN-ului patogen:

• pentru a determina sensibilitatea acestuia la anumite tipuri de antibiotice, ceea ce permite tratamentul imediat;
• să controleze răspândirea epidemilor în rândul animalelor domestice și sălbatice;
• pentru a identifica și urmări noi specii microbiene infecțioase și subtipuri de patogeni care au alimentat epidemiile anterioare.

Tipuri de diagnosticare

Metoda standard

Analiza reacției în lanț a polimerazei se efectuează pe baza amplificării multiple (dublării) unui fragment specific de ADN și ARN folosind enzime de primeri speciale. Ca rezultat al lanțului de copiere, se obține o cantitate suficientă de material pentru cercetare.

În timpul procedurii, doar fragmentul dorit (corespunzător condițiilor specifice specificate) este copiat și dacă este prezent efectiv în probă.

Iată cum funcționează PCR: video detaliat cu diagrame utile:

Alte metode

• PCR în timp real. În acest tip de cercetare, procesul de identificare a unui anumit fragment de ADN începe după fiecare ciclu, și nu după finalizarea întregului lanț de 30 - 40 de cicluri. Acest tip de cercetare vă permite să obțineți informații despre cantitatea de agent patogen (virus sau microb) din organism, adică să efectuați o analiză cantitativă.
• RT-PCR (mod transcripție inversă). Acest test este folosit pentru a căuta ARN monocatenar pentru a detecta virusurile a căror bază genetică este ARN (de exemplu, virusul hepatitei C, virusul imunodeficienței). În acest studiu, se folosește o enzimă specială - transcriptază inversă și un primer specific, iar ADN-ul monocatenar este construit pe baza ARN. Apoi a doua catenă de ADN este recuperată din această catenă și se efectuează procedura standard.

Indicații pentru testare

Procedura PCR este utilizată în clinica de boli infecțioase, neonatologie, obstetrică, pediatrie, urologie, ginecologie, venerologie, neurologie, nefrologie și oftalmologie.

Indicații pentru testare:

• determinarea riscului de a dezvolta anomalii genetice la un copil cu probabilitatea de patologii ereditare;
• diagnosticarea ambilor părinți atunci când planificați o sarcină sau starea gravă a mamei în timpul unei sarcini în curs;
• dificultăți de concepție, identificarea cauzelor infertilității;
• suspiciunea de infecții cu transmitere sexuală în stadiul acut și cu simptome ale trecerii lor la cronice;
• detectarea cauzelor proceselor inflamatorii de origine necunoscută;
• contacte sexuale ocazionale și regulate neprotejate;
• determinarea sensibilității unui microorganism patogen la antibiotice specifice;
• pacienții cu infecție latentă suspectată pentru a detecta agenți patogeni înainte de apariția simptomelor evidente (diagnostic preclinic);
• pacienții să confirme recuperarea după boală (diagnostic retrospectiv);

Diagnosticarea este, de asemenea, utilizată dacă este necesar să se identifice cu exactitate următorii agenți patogeni::

• virusuri hepatitice (A B C G), imunodeficiență umană, citomegalovirus;
• Vibrio cholerae;
• virus herpes simplex, specii herpetiforme;
• retro - adeno - și rinovirusuri;
• virusuri rubeolă, Epstein-Barr, varicelă (Zoster);
• parvo și picornovirusuri;
• bacteria Helicobacter pylori;
• Legionella, tipuri patogene de Escherichia coli;
• Staphylococcus aureus;
• patogen;
• clostridii, difterie și hemophilus influenzae;

De asemenea, este utilizat pentru a determina infecțiile:

• mononucleoza infecțioasă;
• borelioza, listerioza, encefalita transmisa de capuse;
• candidoză cauzată de ciuperci Candida;
• infecții cu transmitere sexuală – trichomoniază, ureaplasmoză, treponema pallidum, gardnereloză, gonoree, micoplasmoză, chlamydia;
• tuberculoză.

Contraindicatii pt

Deoarece procedura nu se desfășoară cu pacientul, fără niciun impact asupra organismului, ci cu material biologic luat pentru cercetare, nu există contraindicații pentru PCR din cauza absenței unui potențial pericol.

Cu toate acestea, biomaterialul nu este colectat din canalul cervical al uterului după procedura de colposcopie. Trimiterea frotiurilor și răzuirii pentru analiză este permisă numai la 4-6 zile după încheierea menstruației și încetarea completă a secreției.

Este metoda sigură?

Nu este posibil niciun impact negativ asupra pacientului în timpul unui studiu izolat al biomaterialului său în laborator.

Pregătirea pentru procedură (depunerea substanțelor biologice pentru analiză)

Orice fluid biologic, țesut sau secreții corporale servesc ca probă pentru analiza PCR, care detectează ADN-ul unui agent patogen străin. Substanța de testat este luată sub formă de prelevare de sânge dintr-o venă, răzuire din laringe, cavitate nazală, uretră, cavitate pleurală, col uterin.

Înainte de procedura de diagnostic, medicul explică pacientului ce material va fi colectat:

1. La examinarea infecțiilor cu transmitere sexuală, se colectează secreții din organele genitale, urină și un frotiu din uretra.
2. Când se analizează infecțiile herpetice, se prelevează citomegalovirus, mononucleoză, urină și un tampon de gât pentru analiză pentru hepatită, toxoplasmoză, se prelevează sânge dintr-o venă.
3. În scopuri de diagnostic diverse tipuri Se colectează lichidul cefalorahidian.
4. În pneumologie, probele pentru analiză sunt spută și lichid pleural.
5. Atunci când se efectuează un studiu al posibilelor infecții intrauterine în timpul sarcinii, lichidul amniotic și celulele placentare sunt utilizate pentru analiză.

Fiabilitatea și acuratețea analizei depind de sterilitatea condițiilor la luarea materialului. Deoarece testarea PCR este foarte sensibilă, orice contaminare a substanței de testat poate distorsiona rezultatul.

Pregătirea competentă pentru livrarea de biomaterial nu prezintă dificultăți pentru pacienți. Există anumite recomandări:

• când se analizează infecțiile cu transmitere sexuală:
  • excludeți contactele intime cu 72 de ore înainte de trimiterea materialului;
  • opriți utilizarea oricăror produse vaginale cu 3 zile înainte;
  • din seara zilei precedente nu efectuați igiena zonei examinate;
  • excludeți urinarea cu 3-4 ore înainte de a preleva o probă din uretră;
• încetați să luați antibiotice cu o lună înainte de testarea pentru infecții;
• sângele este donat dimineața înainte de a mânca și a bea;
• Prima probă de urină de dimineață este colectată într-un recipient steril după o toaletă intimă amănunțită.

Citiți mai jos despre modul în care se efectuează diagnosticarea folosind metoda reacției în lanț a polimerazei.

Cum funcționează procedura?

Când se efectuează un studiu PCR, anumite cicluri sunt repetate din nou și din nou într-un reactor (amplificator sau termociclor):

1. Primul pas este denaturarea. Saliva, sângele, materialul de biopsie, probele ginecologice, sputa, în care se suspectează prezența ADN-ului (sau ARN-ului) unui agent patogen, este plasată într-un amplificator, unde materialul este încălzit și ADN-ul este împărțit în două lanțuri separate.
2. Al doilea pas este recoacerea sau răcirea ușoară a materialuluiși adăugarea de primeri la acesta care pot recunoaște regiunile dorite din molecula de ADN și se pot lega de ele.
3. Al treilea pas este alungirea– apare după ce 2 primeri sunt atașați la fiecare dintre catenele de ADN. În timpul procesului, fragmentul de ADN al agentului patogen este completat și se formează copia acestuia.

Aceste cicluri se repetă ca o „reacție în lanț”, de fiecare dată ducând la dublarea copiilor unui anumit fragment de ADN (de exemplu, segmentul în care este programat un anumit virus). În câteva ore, se formează multe copii ale fragmentului de ADN, iar prezența lor în probă este detectată. După aceasta, rezultatele sunt analizate și comparate cu datele dintr-o bază de date cu diferite tipuri de agenți patogeni pentru a determina tipul de infecție.

Citiți mai jos despre decodificarea rezultatelor și concluzia bazată pe reacția PCR.

Decodificarea rezultatelor

Rezultatul final al studiului se emite la 1 – 2 zile de la depunerea materialului biologic. Adesea - deja în prima zi după analiză.

Analiza calitativă

• Negativ rezultatul înseamnă că nu au fost găsite urme de agenți infecțioși în substanța prezentată pentru testare.
• Pozitiv rezultatul înseamnă detectarea virusurilor sau bacteriilor patogene într-o probă biologică cu un grad foarte mare de acuratețe la momentul depunerii materialului.

Dacă rezultatul este pozitiv, dar nu sunt detectate semne de creștere a infecției, această stare a corpului se numește „transport sănătos” asimptomatică. Cel mai adesea observat la luarea biomaterialului dintr-un anumit loc (canal cervical, uretra, cavitatea bucală) în boli virale. În acest caz, tratamentul nu este necesar, dar este necesară supraveghere medicală constantă, deoarece există posibilitatea de:

• răspândirea virusului de la purtători și infectarea persoanelor sănătoase;
• activarea procesului și trecerea bolii la o formă cronică.

Totuși, dacă testul de sânge este pozitiv, acest lucru indică faptul că infecția a lovit corpul, iar aceasta nu mai este o stare de purtător, ci o patologie care necesită o terapie specifică imediată.

Analiza cantitativă

Rezultatul cantitativ este determinat de un specialist special pentru un anumit tip de infecție. Pe baza acestuia, este posibil să se evalueze gradul de dezvoltare și stadiul bolii, ceea ce face posibilă prescrierea promptă a tratamentului corect.

Cost mediu

Prețurile pentru reacția în lanț a polimerazei sunt determinate de: tipul cercetării, dificultatea identificării agentului patogen, dificultatea colectării materialului biologic, tipul analizei (calitative sau cantitative) și nivelul prețului în laborator.

Pe de altă parte, atunci când se studiază PCR, este posibil să se identifice mai mulți agenți patogeni simultan atunci când se colectează un tip de material pentru analiză. Acest lucru vă permite să economisiți la alte teste de laborator.

Costul aproximativ al analizei PCR în ruble:

• gonococ, gardnerella, trichomonas vaginalis – de la 180
• Chlamydia trachomatis – din 190
• papilomavirus - de la 380 la 500
• biocenoza tractului urogenital la femei (evaluarea cantitativă și calitativă a microflorei) – de la 800.

Și mai multe informații utile cu privire la testarea PCR sunt conținute în videoclipul de mai jos:

Descriere

Reacția în lanț a polimerazei (PCR) a fost inventată în 1983 de biochimistul american Carey B. Mullis. În 1993, a primit Premiul Nobel pentru această descoperire.

Astăzi, domeniile de aplicare a PCR ca metodă modernă de biologie moleculară sunt extrem de largi. Diagnosticul PCR ocupă un loc special în practica medicală. Și motivul pentru aceasta este destul de simplu: reacția în lanț a polimerazei face imposibilul posibil.

Diagnosticarea PCR este adesea descrisă figurativ ca o metodă prin care puteți găsi un ac într-un car de fân și apoi puteți construi un car de fân din aceste ace. „Acul” este o bucată mică din materialul genetic al unei celule (ADN sau ARN).

Astfel, descoperirea acestei metode este unul dintre cele mai remarcabile evenimente din domeniul biologiei moleculare din ultimele decenii. Dezvoltarea metodei PCR a permis diagnosticului medical în general să se ridice la un nivel calitativ nou.

Bazele PCR

Baza metodei este copierea selectivă (amplificarea) repetată a unei anumite secțiuni de ADN pentru a obține o astfel de cantitate de material genetic care să fie suficientă pentru detectarea vizuală. În acest caz, doar o anumită secțiune de ADN este copiată (amplificată) de multe ori, cu condiția ca aceasta să fie prezentă în biomaterialul studiat.

În plus, cercetarea, pe lângă pur și simplu creșterea numărului de copii ale secțiunilor ADN, permite alte manipulări cu material genetic. Prin urmare, metoda este utilizată pe scară largă în cercetarea științifică, în practica biologică și medicală: în diagnosticul bolilor infecțioase și ereditare, în identificarea mutațiilor, genotiparea, stabilirea paternității, identificarea personală etc.

PCR în diagnosticul bolilor infecțioase

Astăzi, diagnosticarea PCR a infecțiilor este una dintre cele mai precise, sensibile și eficiente clinice metode de laborator. Mai mult, gama de agenți patogeni detectați este practic nelimitată - ar fi dezvoltat un sistem de testare pentru analiza PCR a agentului patogen dorit.

Datorită sensibilității sale ridicate, PCR vă permite să identificați agentul patogen chiar și cu conținutul său minim (adică doar câteva molecule din ADN-ul său sunt prezente în biomaterialul studiat).

PCR detectează agenți patogeni ai bolilor infecțioase atunci când acest lucru nu se poate face prin alte metode (imunologice, culturale, microscopice). Prin urmare, pentru o serie de agenți infecțioși, metoda reacției în lanț a polimerazei a devenit „standardul de aur”, este testată în timp și clinic. În diagnosticul de laborator modern al bolilor infecțioase, PCR este cea mai sensibilă și specifică metodă pentru detectarea directă a agenților patogeni. Acest lucru permite nu numai stabilirea etiologiei bolii, ci și monitorizarea cursului procesului infecțios și evaluarea eficacității tratamentului.

Testarea ITS prin metoda PCR este deosebit de relevantă în cursul asimptomatic al unui proces infecțios cauzat de microorganisme patogene necondiționat (Chlamydia, determinarea calitativă a ADN-ului; Mycoplasma, determinarea calitativă a ADN-ului; Agent gonoree, determinarea calitativă a ADN-ului; Agent trichomoniază, determinarea ADN-ului calitativ) . De exemplu, cu gonoreea cronică la femei, chiar și folosind metoda bacteriologică, adesea nu este posibil să se identifice gonococul, în ciuda simptomelor existente ale unui proces inflamator cronic în colul uterin sau uretra.

Diagnosticul PCR modern permite nu numai identificarea materialului genetic al agenților infecțioși, ci și determinarea concentrațiilor lor de ADN/ARN (format de cercetare cantitativă). Determinarea numărului de agenți patogeni este importantă în luarea deciziei asupra tratamentului, mai ales dacă sunt identificate microorganisme oportuniste (Mycoplasma, cuantificarea ADN-ului; tiparea Ureaplasmei, cuantificarea ADN-ului).

Una dintre direcțiile principale în dezvoltarea metodei PCR este formatul „Multiprime” dezvoltat la CMD, care face posibilă detectarea mai multor agenți patogeni într-o eprubetă (și o reacție).

• Agenții patogeni ai infecțiilor transmise de căpușe ixodide

Diagnosticul PCR al hepatitei

În prezent, se cunosc cel puțin 5 virusuri a căror capacitate de a provoca leziuni hepatice a fost dovedită. Aceștia sunt agenții cauzatori ai hepatitei A, B, C, D, E. În cazuri rare, hepatita poate fi cauzată de virusurile Epstein-Barr și herpes simplex. Capacitatea agenților precum virusurile TT și hepatita G de a infecta ficatul nu este recunoscută astăzi de toată lumea. Toate aceste viruși aparțin unor familii diferite, au proprietăți biologice diferite și, în consecință, tactica de tratament va diferi semnificativ în funcție de etiologia hepatitei.

Ținând cont de cele de mai sus, o problemă foarte presantă este diagnosticul etiologic adecvat al hepatitei virale cu identificarea unui anumit agent patogen. Acest lucru este imposibil fără utilizarea metodelor biologice moleculare moderne. Prin urmare, diagnosticarea hepatitei folosind metoda reacției în lanț a polimerazei este una dintre cele mai multe cei mai importanți pașiîn stabilirea cauzei bolii și determinarea tacticilor de tratament ulterioare.

PCR în diagnosticul infecției cu HIV

În prezent, pentru diagnosticul de laborator al infecției cu HIV, se utilizează cea mai accesibilă și în același timp sensibilă abordare - detectarea anticorpilor HIV în sânge cu ajutorul unui test imunosorbent enzimatic (ELISA) - urmată de confirmarea rezultatelor pozitive ale analiza folosind imunoblot (IB). Eficiența identificării persoanelor infectate cu HIV prin această abordare poate ajunge la 99% sau mai mult.

Dar diagnosticul serologic al infecției cu HIV are o serie de limitări:

1. Ineficiență în așa-numita perioadă „fereastră serologică” (în primele săptămâni după infectare, anticorpii nu sunt detectați din cauza absenței lor sau a concentrației scăzute).
2. Anticorpii împotriva HIV au fost detectați de mult timp la toți copiii născuți din mame infectate cu HIV.
3. Rezultate ELISA fals pozitive datorită prezenței în sânge a anticorpilor la antigene similare cu antigenele HIV.
4. Rezultate fals negative și discutabile ale ELISA și imunoblot (în special la pacienții în stadiul terminal al bolii).

Prin urmare, testele PCR pentru depistarea infecției cu HIV sunt acum din ce în ce mai utilizate. Conform " Recomandări metodologice privind efectuarea unei examinări pentru infecția cu HIV" (aprobat de Ministerul Sănătății și Dezvoltării Sociale al Federației Ruse la 6 august 2007) "dacă există criterii epidemiologice care indică un risc recent de infecție cu HIV pentru pacienți și, în același timp, rezultate fals pozitive sau fals negative în ELISA și IB, de exemplu, la examinarea copiilor, născuți din mame infectate cu HIV sau a pacienților în perioada „fereastră seronegativă”, este utilizată metoda PCR, care detectează materialul genei HIV. ...” Și în cazul unui diagnostic deja stabilit de infecție cu HIV, analiza PCR este utilizată pentru prognostic, observare dinamică și monitorizare a terapiei.

• Virusul imunodeficienței umane, determinarea calitativă a ADN-ului provirus, PCR
• Determinarea cantitativă a virusului imunodeficienței umane a ARN, PCR
• Diagnosticare cuprinzătoare: determinarea calitativă a ARN virusului hepatitei C/ADN-ului virusului hepatitei B/virusului imunodeficienței umane (HIV) ARN tipurile 1 și 2

La Centrul de Diagnostic Molecular (CMD), puteți face un test PCR pentru HIV în mod anonim.

Reacția în lanț a polimerazei (PCR) este o metodă de înaltă precizie de diagnostic genetic molecular care vă permite să identificați diferite boli infecțioase și ereditare la om, atât în ​​stadiul acut, cât și în cel cronic, și cu mult înainte ca boala să se manifeste.

Reacția în lanț a polimerazei (PCR) a fost dezvoltată de Kary Mullis (SUA) în 1983, pentru care a fost distins cu Premiul Nobel pentru Chimie în 1993.

Analiza PCR a devenit un fel de „standard de aur” pentru majoritatea infecțiilor. Majoritatea specialiștilor îl întâlnesc aproape în fiecare zi și nu-și pot imagina să facă un diagnostic final fără el. PCR devine adesea singura reacție de identificare a stadiilor active ale bolii în momente în care alte metode de diagnostic bacteriologic, virusologic și imunologic nu funcționează.

Avantajele diagnosticului PCR în medicina modernă:

Detectarea directă a prezenței unui agent patogen (și anume, o regiune specifică de ADN sau ARN a agentului patogen) în proba de testat.
Specificitatea ridicată vă permite să determinați o secțiune unică de ADN sau ARN caracteristică unui anumit agent patogen, ceea ce elimină posibilitatea unor reacții false.
Sensibilitatea ridicată a metodei PCR vă permite să detectați chiar și celule individuale ale agenților patogeni (viruși, bacterii). Sensibilitatea analizei PCR este de 10-1000 de celule în proba de testat (de exemplu, sensibilitatea testelor imunologice și microscopice este de numai 103-105 celule).
Dezvoltarea unei tehnici PCR universale pentru detectarea diferiților agenți patogeni. Obiectul cercetării prin metoda PCR este materialul genetic (ADN, ARN) al agentului patogen. Tehnica vă permite să identificați mai mulți agenți patogeni dintr-o probă biologică.
Primiți rezultatele analizei destul de repede. O examinare completă se efectuează în 4-4,5 ore, mai rar - puțin mai mult.
Capacitatea de a detecta agenți patogeni înainte de apariția simptomelor bolii (diagnostic preclinic) și după trecerea bolii (diagnostic retrospectiv). Un exemplu de diagnostic preclinic ar fi examinarea în timpul perioadei de incubație (din momentul infecției până la apariția plângerilor pacientului), precum și infecția latentă (când nu există deloc simptome, ci doar date de laborator - PCR, de exemplu). Unul dintre aspectele importante ale diagnosticului PCR este efectuarea PCR în material de arhivă sau rămășițe biologice, ceea ce este important pentru identificarea personalității sau a paternității.

În prezent, diagnosticul PCR este în curs de dezvoltare semnificativă. Metoda în sine este îmbunătățită, noi soiuri de PCR apar din nou și din nou, iar noi sisteme de testare pentru această reacție intră pe piața medicală. Datorită acestui fapt, costul studiilor PCR devine din ce în ce mai accesibil pentru o gamă largă de pacienți în fiecare an.

Pe ce se bazează metoda PCR?

Baza reacției în lanț a polimerazei este dublarea (amplificarea) repetată a unei anumite secțiuni de ADN sau ARN folosind enzime în laborator. Ca rezultat, se formează cantitatea de ADN sau ARN suficientă pentru analiza vizuală. În timpul studiului, este copiată numai zona care se potrivește condițiilor specificate și numai dacă este prezentă în proba de testare.

De exemplu, materialul pentru cercetare în care se presupune că este prezent prezența fragmentelor de ADN sau ARN ale unui agent patogen (salivă, sânge, urină, scurgeri din organele genitale) este plasat într-un reactor special (amplificator). În continuare, i se adaugă enzime specifice, care se leagă de ADN-ul sau ARN-ul agentului patogen, iar copia acestuia este sintetizată. Această copiere are loc în mai multe etape, cum ar fi o „reacție în lanț”, și în cele din urmă se pot forma sute și mii de copii dintr-o singură copie a materialului genetic. Urmează apoi analiza și compararea rezultatului cu baza de date existentă privind structura diferiților agenți patogeni. Folosind PCR, puteți nu numai să identificați tipul de agent patogen, ci și să oferiți un rezultat cantitativ al analizei, adică câți agenți patogeni sunt în corpul uman.

Metoda PCR extinde în prezent gama de posibilități de cercetare: introducerea de mutații, splicing fragmente de ADN și s-a răspândit în medicină, de exemplu, pentru stabilirea paternității, apariția de noi gene etc.

Ce infecții pot fi detectate folosind diagnosticul PCR?

1) Infecția cu HIV (virusul imunodeficienței umane HIV-1 poate fi detectat)
2) Hepatită virală A, B, C, G (ARN-HAV, ADN-HBV, ARN-HCV, ARN-HGV)
3) Mononucleoza infecțioasă (ADN virusului Epstein-Barr - EBV)
4) Infecția cu citomegalovirus(ADN-CMV)
5) Infecție cu herpes (virusul ADN herpes simplex HSV tipurile 1 și 2)
6) ITS (infectii cu transmitere sexuala) – ureaplasmoza, gardnereloza, chlamydia, micoplasmoza, trichomonaza,
7) Tuberculoza (Mycobacterium tuberculosis)
8) Virusuri oncogene - infecție cu papilomavirus (papillomavirus uman (inclusiv tipurile sale oncogene 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58 și 59)
9) Borrelioza, encefalita transmisa de capuse
10) Listerioza
11) Candidoză (ciuperci din genul Candida)
12) Infecția cu Helicobacter pylori
si altele

Având în vedere gama de agenți patogeni, diagnosticul PCR este utilizat în mod activ în practica ginecologică, urologică, practica bolilor infecțioase, pneumologie, ftiziologie, gastroenterologie, hematologie, oncologie și altele.

Material pentru cercetare și reguli de colectare

Materialul pentru cercetarea PCR, în care poate fi detectat ADN bacterian străin sau ADN sau ARN viral, poate fi diverse medii biologice și fluide umane: mucus, urină, sânge, spută, răzuire de celule epiteliale, țesut placentar, sânge, suc de prostată, lichid amniotic, lichid pleural.

La depistarea infecțiilor cu transmitere sexuală (ITS), bărbații și femeile sunt testați pentru secreții genitale, un frotiu sau răzuire din colul uterin, un frotiu sau răzuire din uretra (uretra) și urină.

La examinarea pentru infecții (infecții herpetice, CMV, mononucleoză, toxoplasmoză, hepatită B, C, infecție cu HIV), se prelevează sânge pentru PCR.

Pentru a diagnostica mononucleoza infecțioasă, CMV sau infecția herpetică, se ia un tampon din gât și se prelevează urină pentru a testa CMV. Adesea pentru a examina pentru o leziune sistemul nervosÎntr-o serie de studii, lichidul cefalorahidian este luat.

În pneumologie, materialul folosit este sputa și lichidul pleural.

La examinarea infecțiilor intrauterine - lichid amniotic, țesut placentar.

Pregătirea pentru livrarea materialului și diagnosticul PCR

Aproape toți pacienții care sunt supuși diagnosticului PCR au dreptul de a conta pe un rezultat fiabil, precis și rapid, care depinde în mare măsură de capacitățile laboratorului și de profesionalismul medicului de laborator. În același timp, mulți nu cred că această fiabilitate depinde în mare măsură de noi înșine, și anume de recomandările medicului curant, de stilul de viață și de corectitudinea colectării materialelor. La colectarea materialului, sunt necesare condiții care să excludă contaminarea (contaminarea) materialului și, în consecință, să pună la îndoială obiectivitatea analizei.

Pregătirea corectă pentru trimiterea materialului nu este deosebit de dificilă. Există următoarele recomandări de la medici pentru pacienți:

1) să nu fie activ sexual cu o zi înainte de a trimite materialul;
2) sângele pentru testare este donat dimineața pe stomacul gol (nu mâncați și nu beți);
3) la donarea de urină, prima porție de dimineață este colectată într-un recipient curat, steril.

Timp de pregătire pentru analiza PCR

Rezultatul final este gata la 1,5-2 zile de la depunerea materialului. În unele cazuri, rezultatul este gata în prima zi.

Interpretarea rezultatelor PCR

Negativ rezultatul PCR indică faptul că nu au fost găsite urme de agenți infecțioși în materialul de testat la momentul livrării. Cele mai multe cazuri arată absența infecției care s-a încercat să fie găsită în proba de testare.

Pozitiv rezultatul PCR indică detectarea urmelor de infecție în proba biologică testată. Cu mare acuratețe, un rezultat pozitiv indică prezența infecției în în acest moment timp.

Există situații în care PCR se dovedește a fi pozitiv, dar nu se poate vorbi de o infecție activă - acesta este așa-numitul „purtător sănătos” fără simptome clinice ale bolii, care nu necesită tratament, dar necesită monitorizare dinamică de către un medic. . Se observă mai des cu o serie de infecții virale (HPV, infecție CMV, infecție EBV, infecție herpetică și altele) în materiale precum saliva, răzuire ale canalului cervical, uretra, adică dintr-un focar local. Cu toate acestea, nu trebuie să uităm că transmiterea infecției de la purtători oameni sanatosi este posibilă, la fel și trecerea la o formă cronică a bolii cu activarea procesului. Dacă PCR este pozitivă în sânge, atunci acesta nu mai este un transport și necesită un tratament specific.

Rezultatul cantitativ al PCR este evaluat numai de către un medic individual pentru o anumită infecție separat și nu are gradări generale. Pe baza rezultatului PCR cantitativ, medicul poate determina gradul de activitate a infecției și poate stabili stadiul bolii, care va afecta cu siguranță cursul și dozele de medicamente prescrise.

Una dintre ultimele întrebări interesante: cât de precisă este diagnosticarea PCR?

Există 3 definiții pentru analiza PCR:

1. Acuratețe (cu un grad ridicat de probabilitate este posibilă detectarea sau evitarea infecției).
2. Specificitatea (acuratețea detectării unei anumite infecții).
3. Sensibilitate (chiar și cu un conținut scăzut de material genetic al agenților patogeni din proba de testat, infecția va fi detectată).

Reacția în lanț a polimerazei practic nu produce rezultate fals pozitive (adică nu există probe pozitive în care nu există infecție). False negative sunt rar observate (mai des acest lucru se datorează absenței unei infecții active la o persoană în acest moment). De exemplu, infecție latentă, infecție cronică fără activitate.

Medicul boli infecțioase N.I

Videoclip despre de ce și cum să faceți un test PCR pentru infecții

PCR (reacția în lanț a polimerazei) este o realizare a biologiei moleculare, una dintre principalele metode de diagnosticare clinică de laborator de la sfârșitul secolului XX și începutul secolului XXI, aducând beneficii enorme în diverse domenii ale științei medicale.

Astfel, chiar dacă printre milioanele de celule ale corpului uman nu virusul viu în sine se pierde, ci doar o particulă din ADN-ul său, atunci PCR, dacă nimic nu interferează cu acesta, probabil va face față sarcinii și va raporta prezența. a unui „străin” cu un rezultat pozitiv. Aceasta este esența PCR și principalul său avantaj.

Avantaje și dezavantaje

Laboratorul care efectuează diagnostice PCR este supus celor mai înalte cerințe în ceea ce privește echipamentul, sistemele de testare și calificarea personalului medical. Acesta este un laborator de înaltă tehnologie care are un arsenal de reactivi foarte sensibili și foarte specifici, deci nu are dezavantaje deosebite. Cu excepția cazului în care dă un rezultat pozitiv în absența manifestărilor clinice și, prin urmare, pune clinicianul într-o dilemă: merită să începeți tratamentul sau nu?

Medicul care observă pacientul începe să se îndoiască de fiabilitatea rezultatelor testelor, deoarece nu vede niciun semn al bolii. Dar totuși, având în vedere sensibilitatea ridicată a sistemului PCR, trebuie amintit că detectează agentul patogen chiar și în stadiul preclinic, iar un rezultat pozitiv în acest caz este mai mult un avantaj decât un dezavantaj. Pe baza acestui fapt, medicul curant trebuie să decidă el însuși oportunitatea terapiei, ținând cont de alte argumente pro și contra.

Avantajele diagnosticului folosind reacția în lanț a polimerazei sunt evidente:

• Specificitate ridicată, ajungând la 100%, datorită prezenței particulelor în proba selectată acizi nucleici, inerent unui anumit organism, dar străin omului;
• Performanță ridicată, deoarece PCR este o tehnică automatizată de înaltă tehnologie care oferă posibilitatea de a efectua testarea în ziua colectării materialului și astfel eliberează pacientul de griji inutile;
• PCR, lucrând pe un eșantion, este capabil să efectueze mai multe studii și detectează mai mulți agenți patogeni, dacă are o astfel de sarcină. De exemplu, la diagnosticarea unei infecții cu chlamydia, unde PCR este una dintre metodele principale, alături de chlamydia, se poate detecta și Neisseria (gonococ), agentul cauzal. Mai mult, acest lucru nu afectează negativ fiabilitatea rezultatelor;
• Testarea PCR dezvăluie microorganisme periculoase în perioada de incubație, atunci când nu au avut încă timp să provoace vătămări semnificative organismului, adică diagnosticul precoce avertizează asupra dezvoltării iminente a procesului patologic, ceea ce face posibilă pregătirea pentru acesta și luarea lui complet pregătită.

În plus, pentru a evita neînțelegerile care apar uneori în timpul diagnosticului, PCR se protejează și prin faptul că rezultatele sale pot fi înregistrate (fotografie, computer) în scopul utilizării lor în scop expert, dacă este necesar.

Norma pentru răspunsurile PCR este un rezultat negativ., indicând absența fragmentelor de acizi nucleici străini, un răspuns pozitiv va indica prezența infecției în organism, valorile digitale indică starea virusului și concentrația acestuia la momentul testării. Cu toate acestea, o interpretare completă a analizei este efectuată de un medic care a urmat o pregătire specială pe tema „PCR”. Nu are rost să încerci să interpretezi singur rezultatele, deoarece poți, așa cum se întâmplă cel mai probabil, să înțelegi greșit și să începi să te îngrijorezi în avans.

De ce „se teme” PCR, ce poate face și cum să se pregătească pentru ea?

Ca și în cazul oricărei alte cercetări, uneori rezultatele testelor sunt fals pozitive sau fals negative, unde PCR nu face excepție. Acest lucru se poate întâmpla în următoarele cazuri:

1. Încălcări ale procesului tehnologic la una dintre etapele reacției;
2. Nerespectarea regulilor de colectare a materialului, depozitare sau transport;
3. Prezența impurităților străine în material.

Acest lucru sugerează că diagnosticarea PCR a infecțiilor trebuie abordată cu atenție, precauție și acuratețe, altfel probele de material își pot schimba structura structurală sau se pot prăbuși complet.

Etapele diagnosticului PCR. Rezultatele false pot fi cauzate de încălcări în orice etapă a studiului.

Diagnosticul PCR al infecțiilor aparține categoriei „standardele de aur” printre alte metode de laborator, astfel încât poate fi folosit pentru a căuta agenți patogeni ai multor boli care, la prima vedere, nu au nimic în comun între ele:

• Tuberculoză de diferite localizări, pneumonie (inclusiv atipică, cauzată de chlamydia);
• Infecții ale copilăriei (rujeolă, rubeolă, oreion, rujeolă);
• Difterie;
• Salmoneloză;
• Boala infecțioasă zoonotică - listerioza (boala este caracterizată printr-o varietate de simptome cu afectarea ganglionilor limfatici, a sistemului nervos central și a organelor interne);
• Boli cauzate de virusul Epstein-Barr (mononucleoza infecțioasă etc.);
• Patologia oncologică provocată de infecția cu papilomavirus uman (HPV și tipurile sale);
• Borrelioza (boala Lyme, encefalita transmisa de capuse);
• Infecția cu Helicobacter pylori, al cărei agent cauzal este microbul Helicobacter pylori care trăiește în stomacul uman. S-a dovedit că Helicobacter provoacă dezvoltarea cancerului de stomac sau duoden;
• si aproape totul.

Diagnosticul PCR al infecțiilor cu transmitere sexuală este de o importanță deosebită, deoarece bolile cauzate în acest fel au loc adesea pentru o lungă perioadă de timp fără nicio manifestare clinică, dar în timpul sarcinii încep să devină mai active și, astfel, amenință sănătatea și chiar viața copil. Ei se comportă similar. Unele dintre ele („torță”) se referă și la ITS, astfel încât acestea din urmă necesită o analiză mai detaliată. Cititorul va putea să se familiarizeze cu cele mai populare metode în următoarele secțiuni ale articolului.

Cum să vă pregătiți corect pentru a obține rezultate fiabile?

Să observăm imediat că pregătirea pentru PCR este destul de simplă și nu necesită niciun efort special din partea pacientului. Trebuie doar să finalizați trei sarcini simple:

1. Nu întreține relații sexuale cu 24 de ore înainte de a face testul;
2. Pentru a lua și a testa sânge dintr-o venă, trebuie să vii pe stomacul gol, nici nu poți bea;
3. Urina trebuie donată noaptea (dimineața - într-un borcan steril achiziționat cu o zi înainte de la farmacie).

PCR poate funcționa în orice mediu biologic

Metoda PCR nu este „setă de sânge” și, prin urmare, acceptă orice mediu biologic care conține un agent infecțios suspectat alegerea a ceea ce să ia pentru cercetare rămâne la medic.

Astfel, în căutarea unui agent patogen, pe lângă un test de sânge (deși acesta este, de asemenea, potrivit și în cele mai multe cazuri este luat în paralel cu alt material), puteți utiliza:

• (secreții din tractul urogenital);
• Razuirea mucoaselor cavitatea bucală, conjunctiva, nazofaringe, tractul genital (la femei sunt luate din colul uterin și vagin, la bărbați - din uretră);
• Salivă;
• Spermatozoizi;
• Suc de prostată;
• Țesut placentar și lichid amniotic (lichid amniotic);
• Sediment de urină (după centrifugare), de exemplu, pentru a detecta unele ITS și Mycobacterium tuberculosis;
• Spută și lichid pleural în același scop;
• Exudate;
• Lichidul cefalorahidian dacă se suspectează o infecție a sistemului nervos central;
• Material de biopsie (bioptat) prelevat din ficat, duoden, stomac etc.

La cele de mai sus, aș dori să adaug că în toate cazurile, va exista suficient material pentru testare, chiar și în răzuire și secreții, deoarece testarea prin PCR nu necesită volume mari pentru analiză, care sunt de obicei prelevați; într-un microtub Eppendorf și trimis pentru testare.

Boli și utilizări ale PCR

HIV și reacția în lanț a polimerazei

De obicei, la efectuarea unei examinări anonime, în cazul rezultatelor pozitive ale imunoblotării, diagnosticul se repetă din nou. Dacă diagnosticul este confirmat, pacientului i se prescriu teste suplimentare:

1. Determinarea, cu ajutorul reacțiilor imunologice, a valorilor absolute ale numărului de limfocite CD 4 (celule imunocompetente - T-helper sau helpers), pe care infecția le afectează mai întâi, după care își pierd proprietățile de bază și nu pot distinge între „sine” și „străin”. Aceștia confundă ARN-ul viral care circulă în plasma sanguină cu celule normale ale corpului și nu reacţionează la ele;
2. Detectarea ARN viral prin PCR și calculul concentrației particulelor virale pentru a stabili stadiul, severitatea procesului patologic și prognosticul pe baza acestor date. Desigur, cuvântul „normă” nu există în acest sens, deoarece reacția este întotdeauna pozitivă, iar descifrarea valorilor digitale este de competența medicului.

PCR și hepatită

Metoda PCR poate detecta agenți patogeni cel mai adesea testul este utilizat pentru a diagnostica hepatita C, care este dificil de detectat prin alte metode.

Virusul hepatitei C (conținând ARN) seamănă cu HIV în comportamentul său în corpul uman. Înfipt în genomul celulelor hepatice (hepatocite), rămâne acolo așteptând în aripi, care poate veni în cel puțin 2 ani, chiar și în 20 de ani, motiv pentru care medicii l-au poreclit „ucigașul blând”. Hepatita C duce la formarea unui proces malign în parenchimul hepatic, care se manifestă în etapele ulterioare. Toate aceste evenimente sistemul imunitar nu observă, confundând virusul cu un hepatocit. Adevărat, anticorpii împotriva virusului sunt produși în anumite cantități, dar nu oferă un răspuns imunitar decent. Pentru diagnosticarea hepatitei C, ELISA nu este foarte informativ, deoarece indică faptul că virusul a lăsat urme, dar nu se știe dacă a dispărut de la sine. Cu HCV se cunosc cazuri de autovindecare, în timp ce anticorpii împotriva virusului rămân și continuă să circule pe viață (memorie imunologică). PCR este vizibil înaintea formării anticorpilor și poate detecta o particulă virală în 1-1,5 săptămâni, în timp ce anticorpii pot apărea în intervalul de la 2 luni la șase luni.

Diagnosticarea PCR în cazul suspectării virusului hepatitei C rampante în corpul uman este cea mai optimă metodă de cercetare, deoarece numai ea poate recunoaște prezența unui „inamic blând” în sângele sau biopsia hepatică a pacientului.

Cu toate acestea, uneori există cazuri când anticorpii sunt pozitivi, dar rezultatul PCR este negativ. Acest lucru se întâmplă uneori când cantitatea de virus este foarte mică sau când este într-o stare „latente” în ficat, fără a intra în sânge. Pentru a afla în continuare adevărul, pacientului i se face un al doilea test, sau chiar mai mult de unul.

Infecția cu papilomavirus uman

Dacă autovindecarea nu are loc, aceasta poate, de asemenea, fără să se arate în vreun fel, să persistă mult timp în corpul proprietarului, care nici măcar nu bănuiește, deoarece PCR nu s-a făcut și nu au existat simptome de boala. Cu toate acestea, prezența infecției cu papilomavirus, deși latentă, este departe de a fi indiferentă pentru sănătatea umană, unde anumite tipuri de virusuri care provoacă cancer (tipurile 16, 18) prezintă un pericol deosebit.

Mai des, jumătatea feminină a populației suferă de HPV, deoarece virusul preferă zona genitală feminină, și în special colul uterin, unde unele tipuri de viruși contribuie la dezvoltarea proceselor displazice, iar apoi cancerul de col uterin, dacă displazia nu este tratată. iar virusului i se dă frâu liber. Deci, reacția în lanț a polimerazei va detecta ADN-ul viral și apoi va indica că tipul „rău” sau „bun” (oncogen sau non-oncogen) s-a instalat în corpul femeii.

Alte ITS și infecții cu TORCH

Evident, reacția în lanț a polimerazei poate găsi orice structură străină constând din acizi nucleici, așa că acest test este potrivit pentru identificarea tuturor bolilor cu transmitere sexuală și a infecțiilor TORCH, cu toate acestea, nu este întotdeauna utilizat. De ce, să zicem, să efectuăm studii atât de costisitoare pentru a detecta gonococul, dacă există altele mai accesibile și mai ieftine?

Infecțiile TORCH și ITS sunt atât de interdependente încât uneori este dificil să se determine cărui grup ar trebui să aparțină un anumit agent patogen. În general, poate fi dificil de înțeles, deoarece acestea sunt grupuri destul de diverse de microorganisme care pot fi transmise sexual întotdeauna sau numai în anumite condiții (imunodeficiență), și pot prezenta interes doar în timpul sarcinii, din cauza posibilului impact negativ asupra cursul său și asupra fătului.

PCR este principala metodă de detectare a infecțiilor ascunse

Dezvoltarea manifestărilor clinice se bazează pe diferiți agenți patogeni, care pot fi detectați numai prin PCR, care este sarcina sa principală, uneori împreună cu ELISA și alteori. ca singur test de confirmare, mai ales dacă nu există simptome ale bolii. O astfel de situație dificilă poate fi creată de o infecție polimicrobiană, care, pe lângă agenții patogeni evidenti, include și agenți patogeni oportuniști.

Ureaplasma este adesea considerată împreună cu micoplasma.Și acest lucru nu este fără motiv. Aceste specii, ca și chlamydia, nu sunt nici viruși, nici bacterii, ele trăiesc în interiorul celulelor și sunt clasificate ca ITS, deși prezența lor într-un organism sănătos nu este, de asemenea, neobișnuită. Deci, pentru a distinge un purtător sănătos de o persoană bolnavă, sunt necesare metode speciale, unde PCR este considerată cea mai fiabilă, deoarece, datorită caracteristicilor structurale și comportamentului acestor microorganisme, alte studii sunt ineficiente.

În ceea ce privește (tipul 1, 2) și, care aparține și virusurilor herpetice (tipul 5), situația este și aici ambiguă.

Rata de infectare a populației lumii se apropie de 100%, așa că în acest caz este foarte importantă identificarea virusului și doza acestuia, care joacă un rol mai ales în timpul sarcinii, deoarece pentru un adult, un virus care și-a prins rădăcini în organism. adesea nu provoacă probleme și nu dă semne de boală.

Prin urmare, nu ar trebui să ignorăm o astfel de examinare prescrisă de un medic, deoarece, în unele cazuri, reacția în lanț a polimerazei este o metodă obligatorie și necesară de diagnosticare de laborator care poate proteja nu numai o femeie, ci și o persoană mică, nenăscută de complicații grave. utilizat cu succes în criminalistică pentru identificarea personală, în medicina legală pentru stabilirea paternității, în medicina veterinară, dacă clinica de animale are posibilitatea de a achiziționa echipamente scumpe, precum și în alte domenii (industrie, agricultură etc.).

Video: PCR - esență și aplicare

În medicina modernă, analiza PCR a fluidelor biologice ale corpului este foarte precisă și informativă. Cu ajutorul acestei analize, este detectată prezența particulelor virale și microbiene în organism, chiar dacă boala este ascunsă și nu dă niciun simptom.

Ce înseamnă să-ți prescrii un test PCR? Această abreviere înseamnă metoda reacției în lanț a polimerazei - acesta este un mod special de a efectua cercetări de laborator. Cu această metodă, materialul biologic obținut de la pacient este plasat într-un aparat special. La mediul de testare se adaugă un set de enzime reactive, care ajută la reproducerea materialului genetic al agentului patogen (virus sau microb). Reacția produce un număr mare de copii ale ADN-ului sau ARN-ului, permițând identificarea prin comparație cu o bază de date a infecțiilor virale și microbiene.

Ce înseamnă rezultatul testului PCR? Dacă există un agent cauzal al oricărei infecții în corpul uman, chiar și unul ascuns, această analiză va dezvălui nu numai prezența acestuia, ci și în ce cantitate este prezentă această infecție în organism.

Pentru a testa infecțiile folosind metoda PCR, puteți examina toate fluidele biologice ale corpului - sânge, urină, saliva, secreții genitale, mucus gât și nas. Analiza necesită foarte puțin material, deoarece dacă sunt prezenți agenți patogeni, prin reproducerea copiilor lor, concentrația de informații genetice este adusă la un asemenea nivel care va identifica microbul sau virusul și va determina tipul acestuia. Precizia analizei PCR este foarte mare cu ajutorul acestei analize, astăzi este posibil să se determine aproape toate infecțiile virale, microbiene și de altă natură.

Dar ce dezvăluie cel mai adesea analiza PCR? Lista infecțiilor care pot fi detectate prin această metodă include infecții infecțioase, inclusiv infecții periculoase din punct de vedere social, cum ar fi tuberculoza sau hepatita B și C. Aceeași metodă poate detecta infecția cu HIV, infecțiile cu chlamydia și ureaplasma, micoplasmoza atât a sistemului respirator, cât și a organelor genitale. Folosind această analiză, sunt detectate afte, vaginoză bacteriană și trichomoniaza. Capacitățile acestei metode fac posibilă identificarea infecțiilor ascunse - herpes diferite tipuri, HPV (papillomavirus), precum și identificarea unui microb special responsabil de dezvoltarea ulcerelor gastrice - Helicobatera.

Astăzi, puteți face un test PCR în aproape orice laborator privat sau public. Aceste tipuri de teste sunt efectuate pe toată lumea, copii și adulți. În funcție de scopul analizei, se analizează material biologic diferit în funcție de sex.

Astfel, analiza PCR la bărbați se efectuează pe sânge sau urină, secreții uretrale, mucus din gât sau nas, sucul de prostată sau chiar spermatozoizi. Analiza PCR la femei este posibilă în sânge și urină, secreții vaginale, secreții uretrale, mucus nazal și faringian.

Analiza PCR este foarte des folosită în timpul sarcinii, cu ajutorul ei, infecțiile ascunse sunt detectate în secrețiile vaginale sau în sânge, necesitând o monitorizare specială în această perioadă și, uneori, un tratament adecvat.

Cum se face PCR?

Un test de infecție folosind această metodă este prescris de un medic, adesea materialul este colectat imediat în cabinetul medicului - un urolog sau un ginecolog. Cum se face analiza PCR?

Materialul studiat este amestecat cu reactivi în laborator și se așteaptă reacția. Când sunt prezenți agenți patogeni, copiile ADN-ului sau ARN-ului lor se înmulțesc. Dispozitivul compară fragmentele identificate de material genetic cu bazele de date și identifică cu exactitate agentul infecțios. Dacă este necesar, este indicată și cantitatea de agent patogen din anumite fluide corporale. De obicei, studiul nu durează mai mult de 1-2 zile, dacă este necesar, se efectuează teste exprese.

De unde obțineți analiza PCR? Acest lucru va depinde de ce tipuri de agent patogen sunt suspectate. Dacă este HIV sau hepatită, se prelevează sânge, dacă este vorba de infecții cu transmitere sexuală, se prelevează un frotiu din uretră sau vagin. Dacă se suspectează mononucleoză sau herpes, se ia un tampon în gât. Se mai pot folosi urina, lichidul cefalorahidian, scurgerile din răni, spută etc.

Test de sânge PCR

Pentru rezultate precise și diagnosticarea infecțiilor, este important să donezi sânge dimineața pe stomacul gol. Un test de sânge folosind PCR poate identifica agenții patogeni boli periculoase- HIV, hepatită, sifilis. În perioadele de exacerbare și activitate a virusului, virusurile herpetice, papiloamele și unele altele pot fi detectate în sânge.

Analiza PCR: preparare

Pentru acuratețea absolută a analizei, este importantă o pregătire adecvată pentru aceasta. Cel mai simplu mod de a te pregăti pentru un test de sânge este că nu există restricții de dietă sau de activitate, sângele trebuie luat dimineața, pe stomacul gol. Un test de urină se face după spălarea organelor genitale, din porțiunea din mijloc într-un recipient steril special. Analiza PCR din tractul genital merită o atenție deosebită, așa că este important să știți cum să vă pregătiți. Cu o zi înainte de examinare, sexul este interzis, se recomandă să nu urinați înainte de examinare. În timpul menstruației la femei, data analizei este amânată cu 3-5 zile din momentul ultimei externari.

Cât timp durează efectuarea unui test PCR?

În funcție de capacitățile laboratorului, analiza poate fi pregătită de la câteva ore la câteva zile. În medie, câte zile durează un test PCR? De obicei, aceasta este una sau două zile. În caz de urgență, analiza poate fi efectuată în aceeași zi, în decurs de câteva ore.